1.Што такое культура клетак?
Клеткавая культура адносіцца да выдалення клетак з жывёл або раслін і наступнага вырошчвання іх у спрыяльным штучным асяроддзі.Клеткі можна браць непасрэдна з тканіны і расшчапляць ферментатыўнымі або механічнымі сродкамі перад культываваннем, або яны могуць быць атрыманы з устаноўленых клеткавых ліній або клеткавых ліній.
2.Што такое першасная культура?
Першасная культура адносіцца да стадыі культуры пасля таго, як клеткі аддзяляюцца ад тканіны і размнажаюцца ў адпаведных умовах, пакуль яны не зоймуць усе даступныя субстраты (гэта значыць не дасягнуць зліцця).На гэтай стадыі клеткі неабходна перасеяць, перанясучы іх у новы кантэйнер са свежай асяроддзем для росту, каб забяспечыць больш месца для далейшага росту.
2.1 Клеткавая лінія
Пасля першай субкультуры першасная культура называецца клеткавай лініяй або субклонам.Клеткавыя лініі, атрыманыя з першасных культур, маюць абмежаваную працягласць жыцця (г.зн. яны абмежаваныя; гл. ніжэй), і калі яны праходзяць, дамінуюць клеткі з найбольшай здольнасцю да росту, што прыводзіць да пэўнай ступені генатыпу ў папуляцыі, якая адпавядае фенатыпу.
2.2 Клеткавы штам
Калі субпапуляцыя клетачнай лініі будзе станоўча адабрана з культуры шляхам кланавання або іншым метадам, клеткавая лінія стане клеткавым штамам.Штамы клетак звычайна набываюць дадатковыя генетычныя змены пасля таго, як пачынаецца бацькоўская лінія.
3. Абмежаваныя і бесперапынныя клеткавыя лініі
Нармальныя клеткі звычайна дзеляцца толькі абмежаваную колькасць разоў, перш чым страціць здольнасць да праліферацыі.Гэта генетычна дэтэрмінаваная падзея, якая называецца старэннем;гэтыя клеткавыя лініі называюцца канечнымі клеткавымі лініямі.Аднак некаторыя клетачныя лініі становяцца несмяротнымі ў выніку працэсу, званага трансфармацыяй, які можа адбывацца спантанна або можа быць выкліканы хімічнымі рэчывамі або вірусамі.Калі канчатковая клеткавая лінія падвяргаецца трансфармацыі і набывае здольнасць бясконца дзяліцца, яна становіцца бесперапыннай клеткавай лініяй.
4.Стан культуры
Умовы культывавання кожнага тыпу клетак вельмі розныя, але штучнае асяроддзе для культывавання клетак заўсёды складаецца з адпаведнага кантэйнера, які змяшчае наступнае:
4.1 Субстрат або пажыўнае асяроддзе, якое забяспечвае неабходныя пажыўныя рэчывы (амінакіслоты, вугляводы, вітаміны, мінералы)
4.2 Фактары росту
4.3 Гармоны
4.4 Газы (O2, CO2)
4.5 Рэгуляванае фізічнае і хімічнае асяроддзе (рН, асматычны ціск, тэмпература)
Большасць клетак залежаць ад замацавання і павінны культывавацца на цвёрдым або паўцвёрдым субстраце (адгезійная або аднаслаёвая культура), у той час як іншыя клеткі могуць расці плаваючы ў асяроддзі (суспензійная культура).
5.Криоконсервация
Калі ў субкультуры ёсць лішак клетак, іх трэба апрацаваць адпаведным ахоўным сродкам (напрыклад, ДМСО або гліцэрынай) і захоўваць пры тэмпературы ніжэй за -130°C (крыякансервацыя), пакуль яны не спатрэбяцца.Для атрымання дадатковай інфармацыі аб субкультуры і криоконсервации клетак.
6.Марфалогія клетак у культуры
Клеткі ў культуры можна падзяліць на тры асноўныя катэгорыі ў залежнасці ад іх формы і вонкавага выгляду (г.зн. марфалогіі).
6.1 Клеткі фібрабластаў біпалярныя або мультыпалярныя, маюць выцягнутую форму і растуць прымацаванымі да субстрату.
6.2 Клеткі, падобныя на эпітэлій, шматкутныя, маюць больш рэгулярны памер і прымацаваны да матрікса асобнымі лістамі.
6.3 Клеткі, падобныя на лімфабласт, маюць сферычную форму і звычайна растуць у завісі, не прымацоўваючыся да паверхні.
7.Прымяненне культуры клетак
Культура клетак - адзін з асноўных інструментаў, якія выкарыстоўваюцца ў клеткавай і малекулярнай біялогіі.Ён забяспечвае выдатную мадэльную сістэму для вывучэння нармальнай фізіялогіі і біяхіміі клетак (напрыклад, метабалічных даследаванняў, старэння), уплыву лекаў і таксічных злучэнняў на клеткі, а таксама мутагенезу і канцэрагенных эфектаў.Ён таксама выкарыстоўваецца для скрынінга лекаў, распрацоўкі і буйнамаштабнай вытворчасці біялагічных злучэнняў (такіх як вакцыны, тэрапеўтычныя бялкі).Галоўная перавага выкарыстання клетачнай культуры для любога з гэтых прыкладанняў - паслядоўнасць і ўзнаўляльнасць вынікаў, якія можна атрымаць з дапамогай партыі кланаваных клетак.
Час публікацыі: 3 чэрвеня 2019 г